Comentários / UFAM (Universidade Federal do Amazonas) - Biólogo - COMVEST - UFAM (Comissão Permanente de Concursos da Universidade Federal do Amazonas) - 2016

Questão:

Plasmídeos são DNAs extracromossomais de replicação autônoma, extensamente utilizados como vetores moleculares em engenharia genética. Um dos métodos utilizados para a extração desse tipo de macromolécula de bactérias é chamado de lise alcalina ou minipreparação (Miniprep) e é composto de várias etapas nas quais as seguintes substâncias/soluções são utilizadas:
Solução I: Tris-HCl (pH 7.5) 100 mM; EDTA 10mM;
Solução II: NaOH 1 M; SDS 5.3% (p/v). Após adição de 130 mL de água destilada a solução fica NaOH 0.2 M e SDS 1% (p/v)
Solução III: Acetato de potássio 3 M; ácido acético 2 M
Tampão TE: Tris-HCl (pH 7.5) 10 mM; EDTA 0.1 mM
Isopropanol: 100% Etanol: 70%
No que se refere às funções das soluções anteriormente citadas, assinale a alternativa INCORRETA:

a) A Solução I permite lavar as bactérias e simultaneamente, devido à presença de EDTA, dar início à proteção do DNA contra a ação de DNAses.

b) A Solução II é utilizada para lisar as células bacterianas e desnaturar o DNA.

c) A Solução III permite a precipitação dos DNAs plasmidiais, mantendo em solução o DNA cromossomal.

d) O Tampão TE é utilizado para redissolver o DNA na fase final do processo.

e) O Isopropanol 100% é utilizado para precipitar o DNA plasmidial. No passo seguinte Etanol 70%, lava o excesso de sal do sedimento do DNA plasmidial precipitado.