Células mantidas em cultura por longos períodos acabam perdendo suas características fenotípicas, pois após várias divisões celulares há maior probabilidade de danos ao seu DNA. Um procedimento que busca evitar essas alterações é submeter as culturas ao congelamento, sobre o qual está correto afirmar o seguinte:
a) técnicas de congelamento não são úteis para os laboratórios de cultura de células dos grandes bancos mundiais fornecedores de linhagens.
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b)
as células em cultura geralmente são congeladas diretamente nas garrafas de cultivo, apenas reduzindo a temperatura para -10°C. |
c)
apenas em temperaturas muito baixas (-196°C, obtidas com uso de nitrogênio líquido) as reações bioquímicas nas células ficam paralisadas, impedindo qualquer alteração na cultura criopreservada. |
d)
no processo de congelamento lento, em que a temperatura vai diminuindo de maneira controlada (1-2°C por minuto), ocorre maior formação de cristais de gelo no meio intracelular, levando ao rompimento das membranas e morte celular. |
e) crioprotetores, tais como o glicerol e o dimetilsulfóxido (DMSO), são substâncias que, sob diferentes mecanismos moleculares, impedem a formação de cristais por aumentarem a osmolaridade do meio extracelular.
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